轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來(lái)源：細(xì)胞培養(yǎng)操作過(guò)程要使用超凈工作臺(tái)http://www.suofeier.cn/hangye/2891.html

目的：建立一套適用的培養(yǎng)操作規(guī)程，進(jìn)行**條件下體外細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)。

主體內(nèi)容：操作步驟：

1、紫外燈照射超凈工作臺(tái)30分鐘(根據(jù)實(shí)際情況，可適當(dāng)延長(zhǎng)或縮短照射時(shí)間，但時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)總比時(shí)間短一點(diǎn)安全。)

2、將培養(yǎng)液、PBS、胰酶放在37℃水浴中溫育(每次用多少，溫育多少，這樣既可節(jié)約溫育的時(shí)間，又可延長(zhǎng)藥品的使用期限。)

3、超凈工作臺(tái)照射30分鐘后，關(guān)閉紫外，打開(kāi)照明，打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再次進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)室。(注意：要打開(kāi)排風(fēng)10分鐘后再進(jìn)行操作，這樣才能保障循環(huán)的風(fēng)是無(wú)菌的。同時(shí)還會(huì)避免有菌的風(fēng)直接吹到人的呼吸道中，對(duì)人體也有一定的保護(hù)作用)

4、戴上口罩及手套(有條件的**好戴上帽子，不過(guò)也沒(méi)關(guān)系，我們實(shí)驗(yàn)室就沒(méi)戴)

5、用70-75%的酒精擦試實(shí)驗(yàn)物品，然后拿入超凈工作臺(tái)中。

6、操作時(shí)注意以下幾點(diǎn)：盡量在酒精燈火焰附近操作，但如果管子里有細(xì)胞就要離火焰有一定距離了，否則細(xì)胞要燙死了;不要重復(fù)使用移液管(即吸一次后，就換新的管);不要在敞開(kāi)的容器上方操作;手上的酒精不要擦太多，否則靠近酒精燈時(shí)容易把手燒到(我想很多人都有過(guò)被燒的經(jīng)歷吧);

其實(shí)操作是很簡(jiǎn)單的，但一定要仔細(xì)。尤其是第2步許多人都不注意，細(xì)胞平時(shí)放在37℃培養(yǎng)，如果加入的PBS或胰酶溫度太低，會(huì)對(duì)細(xì)胞有操傷的，雖然這種損傷短期內(nèi)察覺(jué)不到，但時(shí)間長(zhǎng)了，就會(huì)顯現(xiàn)出來(lái)。